ГОСТ 9.085-78

Группа Т99 

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

Единая система защиты от коррозии и старения

ЖИДКОСТИ СМАЗОЧНО-ОХЛАЖДАЮЩИЕ

Методы испытаний на биостойкость

Single corrosion and ageing protection system.
Cooling lubricant. Bioresistance test methods 

ОКСТУ 0009 
Дата введения 1979-07-01 

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ 

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством нефтеперерабатывающей и нефтехимической промышленности СССР

РАЗРАБОТЧИКИ

М.А.Кравцов, А.А.Ковалев (руководители темы); В.И.Качан, канд. хим. наук; М.З.Савицкая

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 27.06.78 N 1699

3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

4. ПЕРИОДИЧНОСТЬ ПРОВЕРКИ - 5 лет.

5. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Обозначение НТД, на который дана ссылка
	Номер пункта
	
ГОСТ 9.023-74
	1.7
	
ГОСТ 9.048-89
	1.3; 1.4.1; 3.2.3; 3.3; 3.4.1; 3.4.2; 3.4.4; 3.4.5; 3.7
	
ГОСТ 9.082-77
	1.2.4.3, 1.3, 1.4.2, 1.4.4
	
ГОСТ 83-79
	1.3
	
ГОСТ 2517-85
	1.2.1
	
ГОСТ 3118-77
	1.3
	
ГОСТ 3773-72
	2.3
	
ГОСТ 4171-76
	2.3
	
ГОСТ 4204-77
	1.3
	
ГОСТ 4220-75
	1.3
	
ГОСТ 5949-75
	1.3
	
ГОСТ 9245-79
	1.3
	
ГОСТ 18300-87
	1.3
	
ГОСТ 25336-82
	1.3

6. Снято ограничение срока действия по Протоколу Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации

7. ПЕРЕИЗДАНИЕ с Изменением N 1, утвержденным в октябре 1988 г. (ИУС 1-89)

Настоящий стандарт распространяется на водосмешиваемые смазочно-охлаждающие жидкости (в дальнейшем СОЖ) и устанавливает методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию бактерий и плесневых грибов.

(Измененная редакция, Изм. N 1)

1. МЕТОД ИСПЫТАНИЙ НА СТОЙКОСТЬ К ВОЗДЕЙСТВИЮ АЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ 

1.1. Сущность метода

Сущность метода заключается в выдерживании СОЖ, зараженных культурами бактерий в условиях, оптимальных для их развития, с последующей оценкой биостойкости.

1.2. Отбор проб

1.2.1. Пробы СОЖ отбирают по ГОСТ 2517-85 массой 50 г.

1.2.2. Пробами являются СОЖ в состоянии поставки без специальной очистки и стерилизации.

1.2.3. Проб должно быть не менее трех.

1.2.4. Виды бактерий

1.2.4.1. Для испытаний применяют смесь чистых культур следующих видов бактерий:

Escherichia coli (Migyla) Castellani and Chalmers;

Mycobacterium phlei Lehman and Neum;

Pseudomonas aeruginosa Migyla;

Pseudomonas oleovorans Lee and Chandler;

Staphylococcus aureus Rosenbach.

Кроме чистых культур допускается применять смесь накопительных культур, выделенных из испытуемых СОЖ.

1.2.4.2. Чистые культуры бактерий получают в Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, поддерживают периодическим пересевом и выращивают непосредственно перед испытаниями. Культуры бактерий обновляют один раз в год-два.

1.2.4.1; 1.2.4.2. (Измененная редакция, Изм. N 1).

1.2.4.3. Пересев, выращивание и хранение культур бактерий производят, как указано в ГОСТ 9.082-77.

1.3. Аппаратура, материалы и реактивы - по ГОСТ 9.048-89 со следующим дополнением:

термостат, обеспечивающий поддержание постоянной температуры (30±2) °С;

электроплитка с закрытой спиралью;

потенциометр по ГОСТ 9245-79;

горелки газовые;

цилиндры металлические полые, изготовленные из коррозионностойкой стали по ГОСТ 5949-75, внутренним диаметром 7 мм, высотой 10 мм;

чашки биологические (Петри) по ГОСТ 25336-82 с крышками, низкие, типа ЧБН;

груша резиновая;

доска для сушки посуды;

аппарат для встряхивания колб и пробирок;

стандарты мутности;

рН-метр лабораторный типа ЛПУ-01, рН-340 или другого типа с погрешностью не более 0,05 рН;

ножницы, пинцеты, скальпели;

штативы лабораторные;

бульон мясо-пептонный (МПБ) по ГОСТ 9.082-77;

агар мясо-пептонный (МПА) по ГОСТ 9.082-77;

спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-87, высшего сорта;

кислота соляная по ГОСТ 3118-77;

кислота серная по ГОСТ 4204-77;

калий двухромовокислый по ГОСТ 4220-75;

натрий углекислый по ГОСТ 83-79, безводный;

(Измененная редакция, Изм. N 1).

1.4. Подготовка к испытаниям

1.4.1. Посуда и материалы - по ГОСТ 9.048-89.

1.4.2. Среды для выращивания и хранения чистых культур бактерий и для испытаний готовят по ГОСТ 9.082-77.

1.4.3. Рецептура сред приведена в табл.1.

Таблица 1

Наименование реактивов
	Среда
	
	1
	2
	3
	4
	5
	6

	МПА
	агар индикаторный
	Сорокина
	сусло-агар
	Чапека-Докса с агаром
	Чапека-Докса с агаром без сахарозы
	
Калий фосфорнокислый однозамещенный, г
	-
	-
	0,5
	-
	0,7
	0,7
	
Калий фосфорнокислый двузамещенный, г
	-
	-
	1,0
	-
	0,3
	0,3
	
Магний сернокислый, г
	-
	-
	0,2
	-
	0,5
	0,5
	
Натрий азотнокислый, г
	-
	-
	-
	-
	2,0
	2,0
	
Натрий сернокислый, г
	-
	0,5
	-
	-
	-
	-
	
Калий хлористый, г
	-
	-
	-
	-
	0,5
	0,5
	
Железо сернокислое, г
	-
	-
	0,01
	-
	0,01
	0,01
	
Железо лимоннокислое, г
	-
	0,5
	-
	-
	-
	-
	
Аммоний хлористый, г
	-
	-
	0,1
	-
	-
	-
	
Спирт этиловый ректификованный, г
	-
	-
	5,0
	-
	-
	-
	
Сахароза, г
	-
	-
	-
	-
	30,0
	-
	
Пептон бактериологический, г
	-
	10,0
	-
	-
	-
	-
	
Агар микробиологический, г
	20,0
	12,0
	-
	20,0
	20,0
	Выщело- ченный 20,0
	
Мясо-пептонный бульон, см
	до 1000
	-
	-
	-
	-
	-
	
Сусло пивное, см
	-
	-
	-
	до 1000
	-
	-
	
Вода дистиллированная, см
	-
	1000
	до 1000
	-
	до 1000
	до 1000

1.4.4. Чистые культуры бактерий пересевают и выращивают, как указано в ГОСТ 9.082-77.

1.4.5. Для приготовления бактериальных суспензий культуры, выращенные в течение суток, с помощью бактериологической петли переносят в отдельные пробирки, содержащие 10 см водопроводной воды.

1.4.6. Количество бактериальных клеток определяют с помощью стандартов мутности.

Концентрация бактериальных клеток в суспензии должна быть не менее 2 млн/см.

1.4.7. Приготовленные суспензии взбалтывают и сливают в равных объемах (1-2 см) в стерильную пробирку.

1.4.8. Срок хранения суспензии не более 3 ч.

1.5. Проведение испытаний

1.5.1. Круглую или коническую колбу вместимостью 500 см, содержащую 200-300 см среды 1, помещают в водяную баню и выдерживают при температуре (100±2) °С до тех пор, пока среда полностью не расплавится.

Расплавленную питательную среду охлаждают до температуры 40-50 °С и заражают суспензией смеси бактериальных культур, внося последнюю с помощью градуированной пипетки 2 см на 100 см среды.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

1.5.2. Среду после заражения разливают по 15 см в чашки Петри.

1.5.3. На застывшую, строго горизонтальную поверхность среды ставят с помощью пинцета 3 стерильных полых металлических цилиндрика, в каждый из которых вносят по 0,1 см испытуемой СОЖ.

1.5.4. Чашки Петри с цилиндриками закрывают крышками и помещают в термостат при (30±2) °С.

1.5.5. Пробы выдерживают в термостате 24 ч.

1.5.6. Испытания повторяют 3-4 раза.

1.5.7. По окончании испытаний чашки Петри извлекают из термостата и осматривают.

1.6. Оценку бактериостойкости СОЖ проводят по трехбалльной шкале, приведенной в табл.2.

Таблица 2

Балл
	Характеристика балла
	
0
	При осмотре невооруженным глазом наблюдаются большие, четко выраженные зоны отсутствия роста микроорганизмов (зоны ингибирования) вокруг цилиндриков, содержащих СОЖ. Диаметр зоны ингибирования 1,5-2,0 см. Полная бактериостойкость.
	
I
	При осмотре невооруженным глазом заметны зоны отсутствия роста микроорганизмов. Диаметр зоны ингибирования 0,8-1,0 см. Удовлетворительная бактериостойкость.
	
II
	При осмотре невооруженным глазом не наблюдается зон отсутствия роста микроорганизмов. Небактериостойкость СОЖ.

1.7. Требования безопасности - по ГОСТ 9.023-74 со следующим дополнением: необходимо осуществлять систематический контроль загрязнения микроорганизмами воздуха в производственных помещениях.

Количество микроорганизмов не должно превышать 5000-7000 кл/мвоздуха.

2. МЕТОД ИСПЫТАНИЙ НА СТОЙКОСТЬ К ВОЗДЕЙСТВИЮ АНАЭРОБНЫХ (СУЛЬФАТРЕДУЦИРУЮЩИХ) БАКТЕРИЙ 

2.1. Сущность метода

Сущность метода заключается в способности анаэробных бактерий восстанавливать соединения серы с образованием сероводорода и сульфидов металлов.

Микроорганизмы образуют черные зоны сульфида железа, которые учитываются при оценке бактериостойкости СОЖ.

2.2. Отбор проб - по пп.1.2.1-1.2.3.

2.2.1. Виды бактерий - культуры представителей рода Desulfovibrio.

Допускается использование ассоциативных культур этих бактерий с представителями других родов - Pseudomonas, Achromobacter и др.

2.3. Аппаратура, материалы и реактивы по п.1.3 со следующим дополнением:

аммоний хлористый по ГОСТ 3773-72;

натрий сернокислый кристаллический по ГОСТ 4171-76;

железо лимоннокислое, кристаллическое, ч.д.а.;

пептон бактериологический.

2.4. Подготовка к испытаниям - по пп.1.4.1-1.4.4.

2.4.1. Для приготовления бактериальной суспензии используют накопительные культуры сульфатредуцирующих бактерий, выделенные в производственных условиях из пораженных СОЖ.

Для выращивания культуры используют среду 3.

2.4.2. Выращенную культуру в количестве 0,1-0,2 см переносят пипеткой в отдельные пробирки, содержащие 10 см водопроводной воды.

2.4.3. Количество бактериальных клеток определяют с помощью камеры Горяева.

Концентрация бактериальных клеток в суспензии должна быть не менее 2 млн/см.

2.4.4. Срок хранения суспензии не более 1 ч.

2.5. Проведение испытаний.

2.5.1. Испытуемые СОЖ разливают мерной пипеткой по 8-9 см в стеклянные пробирки, добавляют по 0,5-1 см суспензии, тщательно перемешивают и закрывают притертыми пробками.

2.5.2. Пробирки помещают в термостат и выдерживают при температуре (30±2) °С в течение 20-24 ч.

2.5.3. По истечении указанного срока проводят заражение среды 2 испытуемой СОЖ. Для этого 1 см зараженной СОЖ вносят в стерильную пробирку и заливают 10 см предварительно расплавленной и охлажденной до 40-45  °С средой 2.

2.5.4. Для контроля жизнеспособности бактерий в стерильные пробирки вносят 1 см бактериальной суспензии и 10 см среды 2.

2.5.5. Пробирки с зараженными пробами и контрольные пробирки закрывают притертыми пробками, перемешивают содержимое и помещают в термостат с температурой (30±2)  °С.

2.5.6. Пробирки выдерживают в термостате 4 сут.

2.5.7. По окончании испытаний пробирки извлекают из термостата и осматривают.

2.5.8. Если среда 2 в контрольной пробирке остается бесцветной, культуры бактерий считают нежизнеспособными. Испытания прекращают и повторяют их на новых пробах с вновь приготовленной суспензией бактерий из новой партии бактерий.

2.6. Оценку бактериостойкости СОЖ проводят по трехбалльной шкале, приведенной в табл.3.

Таблица 3

Балл
	Характеристика балла
	
0
	Цвет индикаторного агара не меняется, что соответствует отсутствию роста сульфатредуцирующих бактерий. Полная бактериостойкость СОЖ.
	
I
	Проявляются единичные черные колонии в индикаторном агаре. Удовлетворительная бактериостойкость СОЖ.
	
II
	По всей толщине индикаторного агара образуются многочисленные черные колонии. Небактериостойкость СОЖ.

2.5.8; 2.6. (Измененная редакция, Изм. N 1).

2.7. Требования безопасности по п.1.7.

3. МЕТОД ИСПЫТАНИЙ НА СТОЙКОСТЬ К ВОЗДЕЙСТВИЮ ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ 

3.1. Сущность метода

Сущность метода заключается в выдерживании СОЖ, зараженных культурами грибов в условиях, оптимальных для их развития, с последующей оценкой грибостойкости.

3.2. Отбор проб - по пп.1.2.1-1.2.3.

3.2.1. Виды грибов

Aspergillus niger van Thieghem;

Chaetomium globosum Kunze;

Cladosporium gossipicola Pidopl ct Deniak;

Cladosporium resinae Albida;

Penicillium chrysogenum Thom;

Penicillium ochro-cloron Biorge;

Trichoderma koningii Oudemans;

Trichoderma viride Pers. ex. Fr;

Torula convoluta Harz;

Cephalosporium acremonium Corda.

3.2.2. Культуры грибов получают в Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, поддерживают периодическим пересевом и выращивают непосредственно перед испытаниями.

3.2.1; 3.2.2. (Измененная редакция, Изм. N 1).

3.2.3. Пересев, выращивание и хранение грибов - по ГОСТ 9.048-89.

3.3. Аппаратура, материалы и реактивы - по ГОСТ 9.048-89.

3.4. Подготовка к испытаниям

3.4.1. Посуда и материалы - по ГОСТ 9.048-89.

3.4.2. Среды для выращивания и хранения чистых культур грибов и для испытаний готовят по ГОСТ 9.048-89.

3.4.3. Рецептура сред приведена в табл.1.

3.4.4. Чистые культуры грибов пересевают и выращивают по ГОСТ 9.048-89, используя грибы, приведенные в п.3.2.1.

3.4.5. Приготовление суспензии спор грибов и контроль жизнеспособности спор грибов проводят по ГОСТ 9.048-89.

3.5. Проведение испытаний

3.5.1. Коническую колбу вместимостью 500 см, содержащую среду 5 в количестве 300 г, выдерживают при температуре (100±2) °С на водяной бане до полного расплавления среды.

3.5.2. Расплавленную питательную среду охлаждают до температуры 40-45 °С и заражают водной суспензией спор грибов, внося последнюю с помощью градуированной пипетки - 2 см на 100 см среды.

3.5.3. На застывшую строго горизонтальную поверхность среды ставят с помощью пинцета 3 полых металлических цилиндра, в каждый из которых вносят по 0,1 см испытательной СОЖ.

3.5.2; 3.5.3. (Измененная редакция, Изм. N 1).

3.5.4; 3.5.5. (Исключены, Изм. N 1).

3.5.6. Чашки Петри помещают в эксикатор, на дно которого налита дистиллированная вода. Эксикатор устанавливают в термостат с температурой (28±2) °С.

3.5.7. Пробы выдерживают в термостате 28 сут. Через каждые 7 сут крышку эксикатора приоткрывают на 3 мин для притока воздуха.

3.5.8. По окончании испытаний чашки Петри извлекают из эксикатора и осматривают.

3.6. Оценку грибостойкости СОЖ проводят по трехбалльной шкале, приведенной в табл.4.

Таблица 4

Балл
	Характеристика балла
	
0
	Рост плесневых грибов отсутствует. Полная грибостойкость СОЖ.
	
I
	Рост грибов едва виден. Спорообразование не наблюдается. Удовлетворительная грибостойкость СОЖ.
	
II
	Рост грибов отчетливо виден, появляется спорообразование. Негрибостойкость СОЖ.

3.7. Требования безопасности - по ГОСТ 9.048-89.

Текст документа сверен по:
официальное издание
Защита от коррозии.
Часть 6. Защита от биоповреждений. -
М.: Издательство стандартов, 1994 

ГОСТ 9.085-78 ЕСЗКС. Жидкости смазочно-охлаждающие. Методы испытаний на биостойкость (с Изменением 1)

Вид документа: 
Постановление Госстандарта СССР от 27.06.78 N 1699
ГОСТ от 27.06.78 N 9.085-78
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

Принявший орган: Госстандарт СССР

Статус: Действующий
Дата начала действия: 01.07.79

Опубликован: официальное издание, Защита от коррозии. Часть 6. Защита от биоповреждений. - М.: Издательство стандартов, 1994 год
Дата редакции: 01.04.93

Ссылается на 
ГОСТ 5949-75 Сталь сортовая и калиброванная коррозионностойкая, жаростойкая и жаропрочная. Технические условия (с Изменениями N 1, 2, 3)
Постановление Госстандарта СССР от 16.09.75 N 2406
ГОСТ от 16.09.75 N 5949-75
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 2517-85 Нефть и нефтепродукты. Методы отбора проб (с Изменением N 1)
Постановление Госстандарта СССР от 28.12.85 N 4453
ГОСТ от 28.12.85 N 2517-85
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия
Постановление Госстандарта СССР от 26.06.87 N 2705
ГОСТ от 26.06.87 N 18300-87
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 9.048-89 ЕСЗКС. Изделия технические. Методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию плесневых грибов
Постановление Госстандарта СССР от 26.06.89 N 2019
ГОСТ от 26.06.89 N 9.048-89
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 9.023-74 ЕСЗКС. Топлива нефтяные. Метод лабораторных  испытаний биостойкости топлив, защищенных противомикробными присадками
Постановление Госстандарта СССР от 16.04.74 N 900
ГОСТ от 16.04.74 N 9.023-74
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 9.082-77 ЕСЗКС. Масла и смазки. Методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию бактерий (с Изменением 1)
Постановление Госстандарта СССР от 05.12.77 N 2804
ГОСТ от 05.12.77 N 9.082-77
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 83-79 Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия (с Изменениями N 1, 2)
Постановление Госстандарта СССР от 26.01.79 N 246
ГОСТ от 26.01.79 N 83-79
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 3118-77 (СТ СЭВ 4276-83) Реактивы. Кислота соляная. Технические условия (с Изменением N 1)
Постановление Госстандарта СССР от 22.12.77 N 2994
ГОСТ от 22.12.77 N 3118-77
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 3773-72 Аммоний хлористый. Технические условия (с Изменениями N 1, 2, 3)
Постановление Госстандарта СССР от 27.04.72 N 861
ГОСТ от 27.04.72 N 3773-72
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 4204-77 (СТ СЭВ  3856-82) Реактивы. Кислота серная. Технические условия (с Изменениями N 1, 2)
Постановление Госстандарта СССР от 17.06.77 N 1513
ГОСТ от 17.06.77 N 4204-77
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 4220-75 Калий двухромово-кислый. Технические условия (с Изменениями N 1, 2)
Постановление Госстандарта СССР от 14.02.75 N 428
ГОСТ от 14.02.75 N 4220-75
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры (с Изменениями N 1-4)
Постановление Госстандарта СССР от 15.07.82 N 2670
ГОСТ от 15.07.82 N 25336-82
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

На него ссылаются 
ГОСТ Р 52237-2004 Чистота промышленная. Методы очистки смазочно-охлаждающей жидкости от механических примесей. Общие положения
Постановление Госстандарта России от 09.03.04 N 92-ст
ГОСТ Р от 09.03.04 N 52237-2004
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

ПОТ Р М-006-97 Межотраслевые правила по охране труда при холодной обработке металлов
Постановление Минтруда России от 27.10.97 N 55
ПОТ Р от 27.10.97 N М-006-97
Нормативные документы, принимаемые отраслевыми министерствами

Санитарные правила при работе со смазочно-охлаждающими жидкостями и технологическими смазками
Санитарные правила (СП) от 26.09.85 N 3935-85
Приказ Главного государственного санитарного врача СССР от 26.09.85
Нормы, правила и нормативы органов государственного надзора

ГОСТ 12.3.025-80 ССБТ. Обработка металлов резанием. Требования безопасности (с Изменением N 1)
Постановление Госстандарта СССР от 11.12.80 N 5771
ГОСТ от 11.12.80 N 12.3.025-80
Государственные стандарты и другие документы Госстандарта России

Тематики 
Климатические испытания (19.040)

Испытания (19)

Добыча и переработка нефти, газа и смежные производства (75)

Смазки, индустриальные масла и связанные с ними продукты (75.100)